[发明专利]一种金黄色葡萄球菌转座子测序文库及构建方法在审
| 申请号： | 202010648075.6 | 申请日： | 2020-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN111663187A | 公开（公告）日： | 2020-09-15 |
| 发明（设计）人： | 罗东;陈开森;陈嫱;詹佳欢 | 申请（专利权）人： | 南昌大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C40B40/06;C12N15/74;C12N15/65;C12N15/66 |
| 代理公司： | 苏州市拉沃智佳知识产权代理有限公司 32455 | 代理人： | 刘谦 |
| 地址： | 330000 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌转座子测序文库及构建方法，所述构建方法包括：（一）质粒构建：先构建质粒骨架和转座子，再合成完整pSATn21质粒；（二）质粒转化：将pSATn21质粒转入DC10B修饰后再转入金葡菌Newman标准菌株；（三）诱导转座：将上一步所得菌株经培养基培养、转座和洗脱，获得文库；（四）文库验证：在mmeⅠ酶切位点切割该位点下游一定数量的核苷酸序列，得到一段带有转座子片段及一定数量来自于金葡菌Newman基因组的融合片段，通过加接头PCR富集的方式，进行高通量测序。本发明构建方法随机性更高，转座子随机插入至金黄色葡萄球菌基因组的TA位点中，且无偏嗜性；构建的文库为后期高通量筛选细菌耐药、不同条件下的生存能力等奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 金黄色 葡萄球菌 座子 序文 构建 方法 | ||
【主权项】：
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