[发明专利]一种基于结构的CRISPR蛋白的优化设计方法有效
申请号: | 202010666107.5 | 申请日: | 2020-07-12 |
公开(公告)号: | CN111893104B | 公开(公告)日: | 2021-06-04 |
发明(设计)人: | 黄强;薛冬梅;朱海霞;杜文豪 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/113;C12R1/19 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;陆尤 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明属于蛋白质工程技术领域,具体为一种基于结构的CRISPR蛋白的优化设计方法。本发明基于已解析的CRISPR/Cas9蛋白结构,首先通过分析和比较,找出对Cas9某一功能有重要影响的氨基酸位点;然后结合Rosetta优化Cas9的Protein‑DNA相互作用界面,最后设计并获得新型突变体,成功地获得一个突变体yCas9。该突变体具有xCas9相当的剪切活性:宽泛的PAM识别范围,可识别NGG、NGA、NGT、NGC、GAA和GAT,且在基因编辑时脱靶率低。因此,yCas9在功能上可与xCas9并驾齐驱,是一个有潜在应用价值的基因编辑工具,证明本设计方法的有效性和实用性。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 结构 crispr 蛋白 优化 设计 方法 | ||
【主权项】:
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