[发明专利]一种RNA的原位检测方法

摘要

本发明公开了一种RNA的原位检测方法。首先，每个杂交位点使用至少两条目标RNA靶序列识别探针与固定的细胞或者组织样本中的目标RNA靶序列进行杂交。接着，利用另外两段单链DNA通过其末端与上述的靶序列识别探针上的互补序列杂交形成一个带有两个刻痕缺口的环状DNA分子。接着，用DNA连接酶将这两段DNA连接成环后，经过滚环扩增得到滚环扩增产物。而未杂交连接的单链DNA无法成环，因此没有扩增产物。滚环扩增产物与标记的检测探针杂交，多余的检测探针通过洗涤除去；在显微镜下可以观测到单个的滚环扩增产物，通过这些滚环扩增产物的存在和数量可以判定目标RNA在细胞和组织中的表达情况。本发明高度整合了核酸探针技术、滚环扩增技术和原位杂交技术，实现细胞和组织中的RNA表达进行高灵敏高特异性地检测。