[发明专利]脂肪来源间充质干细胞临床级提纯分离、培养扩增和冻存方法在审
申请号: | 202010733939.4 | 申请日: | 2020-07-24 |
公开(公告)号: | CN111763656A | 公开(公告)日: | 2020-10-13 |
发明(设计)人: | 王广平;王知源 | 申请(专利权)人: | 深圳市人和生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A01N1/02 |
代理公司: | 北京捷诚信通专利事务所(普通合伙) 11221 | 代理人: | 宋安东 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种脂肪来源间充质干细胞临床级提纯分离、培养扩增和冻存方法,包括以下步骤:S1.采集脂肪组织;S2.加入洗涤液洗涤脂肪组织;S3.向培养瓶中加入I型胶原酶消化液,获得脂肪SVF细胞滤液;S4.将脂肪SVF细胞滤液离心处理,得到的沉淀为脂肪SVF;S5.弃去上清液,得到净化脂肪SVF沉淀;S6.将培养瓶继续传代培养;S7.原代培养,得到原代细胞;S8.消化收获原代细胞,加入培养基后重悬取样计数;S9.将S8得到的细胞悬液再离心后弃去上清液,将培养瓶进行培养;S10.待S9中细胞融合达到80%以上时,再重复S8和S9,消化洗涤得到细胞沉淀;S11.将10中细胞沉淀取样进行检测;S12.将S11中重悬后得到的细胞沉淀加入完全培养液,待检测结果合格后转移至细胞库内长期保存。 | ||
搜索关键词: | 脂肪 来源 间充质 干细胞 临床 提纯 分离 培养 扩增 方法 | ||
【主权项】:
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