[发明专利]利用CRISPR/Cas9系统构建TAP基因缺失的猪T2细胞的方法有效
| 申请号： | 202010857803.4 | 申请日： | 2020-08-24 |
| 公开（公告）号： | CN111979243B | 公开（公告）日： | 2023-05-23 |
| 发明（设计）人： | 高凤山 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12N9/22 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 李楠 |
| 地址： | 116622 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及利用CRISPR/Cas9系统构建TAP基因缺失的猪T2细胞的方法，属于动物基因工程和遗传修饰技术领域。技术方案主要包括：首先进行TAP2基因敲除，把识别TAP2的sgRNA连接到pUC57‑sgRNA载体上，转化感受态细胞，获得含有靶向识别序列的pUC57‑sgRNA质粒，通过测序筛选阳性克隆。将重组质粒pUC57‑sgRNA和Cas9质粒共转染PK15细胞。在TAP2基因敲除的细胞上利用同样的方法敲除TAP1。本发明利用CRISPR/Cas9构建TAP基因敲除的PK15细胞系，为筛选多种猪源病毒CTL表位建立细胞模型，同时为外源性抗原的TAP非依赖性递呈机制的研究建立了细胞模型。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 crispr cas9 系统 构建 tap 基因 缺失 t2 细胞 方法 | ||
【主权项】：
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