[发明专利]一种多核苷酸激酶检测方法、胞内监测体系及应用有效
申请号: | 202010895846.1 | 申请日: | 2020-08-31 |
公开(公告)号: | CN111979296B | 公开(公告)日: | 2023-03-10 |
发明(设计)人: | 刘宏伟;童春义;周虹延;张大平;蔡正春;胡莉琴;梁仁;王梦瑶;谢洁;刘丽媛;贡雪峰 | 申请(专利权)人: | 湖南艾科瑞生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/48 | 分类号: | C12Q1/48;G01N21/64 |
代理公司: | 厦门原创专利事务所(普通合伙) 35101 | 代理人: | 郭金华 |
地址: | 410000 湖南省长沙市岳麓区学士街道*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明提供了一种多核苷酸激酶检测方法,包括以下步骤:S1,设计合成两个DNA片段DNA1和DNA2,DNA1的序列如SEQ ID:01所示,DNA2的序列如SEQ ID:02所示;根据沃森‑克里克碱基互补配对原则设计合成RNA‑DNA模板链,RNA‑DNA模板链的序列如SEQ ID:03所示;设计合成DNAzyme的底物MB,MB的序列如SEQ ID:04所示;MB的5’端连接荧光基团FAM,MB的3’端连接淬灭基团BHQ1;S2,将DNA1,DNA2,RNA‑DNA模板链混合杂交形成复合探针;复合探针与MB,ATP,T4DNA连接酶和RNase H混合成检测溶液;S3,取检测溶液和待测样品,混合均匀,36‑38℃反应40‑50min后测定荧光强度,根据荧光强度定性或定量多核苷酸激酶。该检测方法背景信号低,灵敏度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 多核苷酸 激酶 检测 方法 监测 体系 应用 | ||
【主权项】:
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