[发明专利]一种猪骨骼肌卫星细胞高效分离和纯化的方法在审
| 申请号： | 202010940072.X | 申请日： | 2020-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN112011502A | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 胡悦旻;鞠辉明 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪骨骼肌卫星细胞体外培养方法，包括以下步骤：将猪骨骼肌肉组织块依次用II型胶原酶溶液和胰蛋白酶消化后过筛，固液分离得到沉淀物；将沉淀物制成细胞悬液采用差速贴壁纯化培养，直到细胞密度达到70%及以上，用胰酶消化，用完全培养基终止消化离心，弃去上清液加入培养基重悬后进行传代培养；骨骼肌卫星细胞的鉴定：对传代培养的骨骼肌卫星细胞进行PAX7和MyoD基因免疫荧光染色鉴定，显示都呈阳性表达，且与DAPI染色的的细胞核完全重叠表明分离的细胞为骨骼肌卫星细胞。本发明的猪骨骼肌卫星细胞体外培养方法操作简便、获得细胞数量多，而且细胞纯度高，为猪骨骼肌的生长发育研究提供材料。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 骨骼肌 卫星 细胞 高效 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
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