[发明专利]一种点突变血小板无力症小鼠模型的构建方法有效

专利信息
申请号: 202010978984.6 申请日: 2020-09-17
公开(公告)号: CN112063654B 公开(公告)日: 2023-04-28
发明(设计)人: 周鹭;江淼;杨飞 申请(专利权)人: 南通大学附属医院
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;A01K67/027
代理公司: 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 代理人: 徐思波
地址: 226019*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明提供一种点突变血小板无力症小鼠模型的构建方法,包括如下步骤:(1)载体设计和构建、体外转录:(1‑1)根据基因信息及实验要求,设计gRNA和Donor Oligo的序列;(1‑2)合成Donor Oligo,构建gRNA载体;(1‑3)将gRNA载体和Cas9载体进行体外转录;(2)显微注射及F0代鼠的鉴定;(3)F1代鼠的繁殖和鉴定:将步骤(2)中性成熟的阳性F0鼠分别与野生型鼠配繁一代,最终提供至少3只经PCR和测序验证的F1代点突变GT小鼠模型;(4)冷冻保种。本发明首次用CRISPR/Cas9技术精准编辑构建点突变血小板无力症小鼠模型,该模型精准编辑小鼠的基因,比以往通过抗体注射诱导或者基因敲除技术构建的GT小鼠模型更为精准。为深入研究GT的发病机制及探索新的治疗方法提供了很好的模型。
搜索关键词: 一种 突变 血小板 无力 小鼠 模型 构建 方法
【主权项】:
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