[发明专利]一种钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法及应用在审
申请号: | 202011076553.7 | 申请日: | 2020-10-10 |
公开(公告)号: | CN112176020A | 公开(公告)日: | 2021-01-05 |
发明(设计)人: | 郝峰;李明光;张丽;郑锴;王双;解宇浩;张嘉琪 | 申请(专利权)人: | 吉林医药学院 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12N15/85;C12N15/65;G01N21/64 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 刘小娇 |
地址: | 132013*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法,包括:分别构建ANO1和YFP‑H148Q/I152L的真核表达载体;将所述真核表达载体分别稳定转染入FRT细胞中,且使所述FRT细胞共表达ANO1和YFP‑H148Q/I152L两种蛋白后,经过多次有限稀释,获取FRT细胞克隆模型;将所述FRT细胞克隆模型传代到黑壁透明底的微孔板中,且使细胞密度为每孔20000个细胞,48h后细胞汇合度达到90%以上;向所述黑壁微孔板中分别加入待测试化合物和碘化钠PBS后测试所述YFP‑H148Q/I152L荧光蛋白的相对荧光强度,当所述相对荧光强度迅速下降时,所述待测试化合物为钙激活氯离子通道激活剂,持续检测相对荧光强度一直保持下降为直接作用于钙激活氯离子通道的激活剂。 | ||
搜索关键词: | 一种 激活 氯离子 通道 激活剂 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】:
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