[发明专利]用于DNA循环迭代组装的系统及方法有效
申请号: | 202011116869.4 | 申请日: | 2020-10-19 |
公开(公告)号: | CN112501191B | 公开(公告)日: | 2023-09-26 |
发明(设计)人: | 元英进;周见庭 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/65;C12N15/55;C12N15/10 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张柳 |
地址: | 300073 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,特别涉及用于DNA循环迭代组装的系统及方法。本发明的循环迭代策略采用四个供体质粒循环利用,采用四个Cas9切割位点和两个筛选标记的设计;本发明中Cas9基因、λRed系统、telN基因是采用质粒形式实现,Cas9基因、λRed系统、telN基因整合到大肠杆菌基因组上可以的达到同样DNA组装的效果。该方法一方面不需要对DNA进行繁琐的体外抽提、酶切、回收等操作,另一方面避免传统大片段DNA组装需要制做原生质体等感受态细胞过程,具有操作简单自动化程度高、成本低等优点。该方法连续组装4轮后,5个DNA片段的组装阳性率可达98.4%,具有DNA组装阳性率高的优点。 | ||
搜索关键词: | 用于 dna 循环 组装 系统 方法 | ||
【主权项】:
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