[发明专利]一种环境样品中硅藻18SrRNA基因拷贝数绝对定量的方法在审
| 申请号： | 202011214326.6 | 申请日： | 2020-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN112210621A | 公开（公告）日： | 2021-01-12 |
| 发明（设计）人： | 孙蓓丽;周克茹;单锴;张佩佩 | 申请（专利权）人： | 江苏宏众百德生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 南京禾易知识产权代理有限公司 32320 | 代理人： | 王彩君 |
| 地址： | 214135 江苏省无锡*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种环境样品中硅藻18SrRNA基因拷贝数绝对定量的方法，涉及硅藻群体的特定引物绝对定量检测方法技术领域，为解决目前市面上缺少标准的目标硅藻群体的特定引物绝对定量检测方法的问题。包括以下步骤：步骤1：进行DNA样品的制备；步骤2：使用DNeasy Powersoil kit对各样品进行DNA提取，将样品按比例稀释到相同的浓度；步骤3：选定3对硅藻检测片段及特异性引物用于预实验；步骤4：选择能够得到拷贝数浓度已知的质粒样品，通过进行Sanger测序计算得到质粒的相对分子质量；步骤5：确定内标添加量和实验条件；步骤6：根据样品提取的DNA浓度确定DNA上样量，采用SYBRGreen法进行预实验；步骤7：采用SYBRGreen法进行实验；步骤8：计算硅藻18SrRNA基因拷贝数。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 环境 样品 硅藻 18 srrna 基因 拷贝 绝对 定量 方法 | ||
【主权项】：
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