[发明专利]一种高通量靶向建库的方法和应用在审

专利信息
申请号: 202011229857.2 申请日: 2020-11-06
公开(公告)号: CN112266948A 公开(公告)日: 2021-01-26
发明(设计)人: 尹东;张寅;汪单兰;黄泳欣;张静源 申请(专利权)人: 中山大学孙逸仙纪念医院
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;C40B50/06;C12Q1/6869
代理公司: 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人: 苏运贞
地址: 510120 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开一种高通量靶向建库的方法和应用。本发明的方法包括如下步骤:基于检测的基因设计并合成靶向捕获探针和PCR扩增引物;将样本基因组DNA和靶向捕获探针杂交过夜,得到捕获的目的片段,环化,酶切,纯化,PCR扩增,得到构建的靶向测序文库;靶向测序文库纯化,检测文库DNA片段浓度和大小,二代测序,根据测序结果分析靶向测序文库的质量和测序信息。本发明能够在一轮PCR反应中扩增上百个检测基因,解决了多重PCR建库只能检测少量基因位点、实验条件难优化的不足;只有一轮PCR,且探针骨架上有随机barcode,减少PCR偏倚,能够区别PCR和测序引入的碱基错误;简化了建库步骤,减少了试剂和时间成本。
搜索关键词: 一种 通量 靶向 方法 应用
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