[发明专利]提高重组大肠杆菌中2’-岩藻糖基乳糖产量的方法

摘要

本发明公开了一种提高重组大肠杆菌中2’‑岩藻糖基乳糖产量的方法，属于基因工程技术领域。本发明采用柔性Linker将四种不同蛋白标签分别融合在α‑1,2‑岩藻糖基转移酶FutC的N端，构建的融合蛋白FP‑futC可以不同程度地提高α‑1,2‑岩藻糖基转移酶催化合成2'‑FL的产量。其中，采用TrxA‑futC融合蛋白合成2'‑FL的产量最高，达到2.94g/L，底物乳糖的消耗达到3.55g/L，乳糖转化率为0.58mol/mol。而在对照组中，不加蛋白标签构建的质粒pMA09‑futC获得的重组大肠杆菌合成2'‑FL的产量仅为1.71g/L，乳糖消耗量为2.88g/L，乳糖转化率仅为0.42mol/mol。进一步将TrxA‑futC融合蛋白基因整合至大肠杆菌MG1655基因组上的yjiP位点，获得一株无质粒的2'‑FL基因工程菌株MG‑26△yjiP::trxA‑futC，摇瓶发酵后2'‑FL的产量达到3.85g/L，乳糖转化率为0.68mol/mol。