[发明专利]血液中游离miRNA文库制备和表达定量的方法及试剂盒有效
申请号: | 202011260858.3 | 申请日: | 2020-11-12 |
公开(公告)号: | CN112359093B | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 李华;谢跃华;胡文献;胡传圣 | 申请(专利权)人: | 苏州京脉生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06;G16B40/10;G16B30/00 |
代理公司: | 江苏昆成律师事务所 32281 | 代理人: | 刘尚轲 |
地址: | 215000 江苏省苏州市吴江区盛泽镇*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本申请涉及血液中游离miRNA文库制备的方法及试剂盒,主要包括步骤:(a)从血液中分离血清或者血浆,提取游离RNA;(b)将所述游离RNA与外源RNA混合,外源RNA序列中任意一部分均不与已知的人/大鼠/小鼠的miRNA序列重合;(c)将步骤(b)中的RNA混合物加接头、反转录第一链、第二链合成及扩增,回收目标DNA片段,获得游离miRNA测序文库。还涉及miRNA表达定量的方法,所述方法包括上述的步骤(a)、(b)和(c),以及:将所述miRNA测序文库进行二代测序和数据分析,在数据分析中,可利用衔接子RA5的S2随机标签序列作为定量化标签,去除PCR重复序列,提高检测的准确性。 | ||
搜索关键词: | 血液 游离 mirna 文库 制备 表达 定量 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
暂无信息
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