[发明专利]一种高通量水产养殖抗生素抗性基因的定量检测方法在审
| 申请号： | 202011445483.8 | 申请日： | 2020-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN112501325A | 公开（公告）日： | 2021-03-16 |
| 发明（设计）人： | 那广水;张鸿;高会;李瑞婧;金帅辰;李西清;王璇;赵琨 | 申请（专利权）人： | 国家海洋环境监测中心;安徽微分基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/6806;C12N15/63 |
| 代理公司： | 安徽申策知识产权代理事务所(普通合伙) 34178 | 代理人： | 程艳梅 |
| 地址： | 116085 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种高通量水产养殖抗生素抗性基因的定量检测方法，包括水产养殖样本的采集，处理、核酸抽提、标准品构建及标准曲线绘制、高通量qPCR检测和数据处理，四环素抗生素抗性基因包括tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetH、tetL、tetM、tetO、tetQ、tetS、tetW、tetX、tetBP等14种；14种标准品构建过程：(1)通过PCR反应扩增出耐药基因的DNA片段；(2)切胶回收耐药基因的普通PCR产物；(3)PCR产物一代测序，并与NCBI数据库比对，比对确定是相对应的基因再进行下一步；(4)将回收的普通PCR产物与克隆载体连接成环状质粒，转化至感受态细菌进行克隆，通过质粒携带的抗性基因筛选出阳性克隆子，分离纯化后提取质粒；(5)对质粒插入片段进行一带测序，跟(3)的序列进行比对，吻合即为该基因的质粒标准品。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通量 水产 养殖 抗生素 抗性 基因 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
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