[发明专利]用于马立克病病毒LAT基因簇miRNA基因编辑的gRNA引物及其应用有效
| 申请号： | 202011535932.8 | 申请日： | 2020-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN112574995B | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | 滕蔓;罗俊;张改平;楚钰淑;郑鹿平;刘金玲;柴书军;赵东 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/66;C12N15/55;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) 41122 | 代理人： | 张爱军 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于马立克病病毒LAT基因簇miRNA(LAT‑miRNA)基因编辑的gRNA引物及其应用，通过对比分析不同毒力MDV‑1编码的LAT‑miRNA及其邻近基因组序列，选取该基因簇5’端和3’端两侧高度保守的区域作为gRNA靶点区，设计合成了互补配对的一系列gRNA，并构建pX459‑gRNA表达质粒，将其两两组合后均能引导CRISPR/Cas9系统精准有效地实现MDV‑1超强毒株GX0101整个LAT‑miRNA的精准编辑和敲除。由于LAT‑miRNA在不同毒力MDV‑1毒株之间具有高度的基因座位保守性和序列保守性，因此利用本发明设计的gRNA，可以精准有效地编辑不同MDV‑1毒株的LAT‑miRNA。该实验方法设计简单、gRNA靶向性好，基因编辑及敲除时效高，为研究其致病、致瘤调控机制及新型疫苗研发提供了新的思路和技术支撑。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 马立克病 病毒 lat 基因 mirna 编辑 grna 引物 及其 应用 | ||
【主权项】：
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