[发明专利]一种sgRNA文库构建方法在审
申请号: | 202110213880.0 | 申请日: | 2021-02-25 |
公开(公告)号: | CN112981544A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 喻明军;崔康乐;王维坤;骆晓雯;纪世春 | 申请(专利权)人: | 通用生物系统(安徽)有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C12N15/10 |
代理公司: | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人: | 刘生昕 |
地址: | 239000 安徽省滁*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种sgRNA文库构建方法,包括以下步骤:第一步、sgRNA设计;第二步、上下游引物合成;第三步、构建sgRNA文库;所述的sgRNA由PCR扩增得到,涉及n条特异性引物Fn1,Fn2,Fn3,—Fnn,一条通用引物R;其中,特异性引物Fn1与载体5’端有20‑50bp同源,通用引物R与载体3’端有20‑50bp同源,且二者之间有15‑50bp的同源,与传统的退火连接方法相比,本发明通过PCR的方法得到混合sgRNA库,大大节省引物合成成本,提高合成产量。本发明提供了一种高通量、高效率的sgRNA基因文库构建方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 sgrna 文库 构建 方法 | ||
【主权项】:
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