[发明专利]无同源性、多个长片段、高效零背景组装方法在审
| 申请号： | 202110220459.2 | 申请日： | 2021-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN112921050A | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 喻明军;崔康乐;王维坤;骆晓雯;纪世春 | 申请（专利权）人： | 通用生物系统（安徽）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/70;C12N15/66 |
| 代理公司： | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人： | 刘生昕 |
| 地址： | 239000 安徽省滁*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了无同源性、多个长片段、高效零背景组方法，包括以下步骤：先在整个环化质粒限制性内切酶Not I位点唯一处，添加一个B片段Yesator i，同时保证B片段左右有且刚好只两个Not I酶切位点，示例无同源性的A、B片段之间设计两条Pr imer 1/2引物，无同源性的B、C片段之间设计两条Pr imer 3/4引物以引物作为两个片段之间连接的桥梁；将所有片段共7个ABCDEFG，同每个片段接头处的一对引物共7对pr imer1‑14，一同转入酵母感受态细胞震荡培养两天；第四步、提取培养两天的酵母质粒；最后经过扩增、检测即得，本发明提供一种无同源性、多个长片段、高效零背景组方法，经过酵母组装、大肠杆菌筛选，即完成零背景克隆，无空载体产出，且相较于传统克隆方式节约大量时间。 | ||
| 搜索关键词： | 同源性 多个长 片段 高效 背景 组装 方法 | ||
【主权项】：
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