[发明专利]一种DNA中5-羟甲基胞嘧啶的定量分析方法有效
申请号: | 202110234320.3 | 申请日: | 2021-03-03 |
公开(公告)号: | CN112961911B | 公开(公告)日: | 2022-11-18 |
发明(设计)人: | 严景丽;孙琳 | 申请(专利权)人: | 河北大学 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6853 |
代理公司: | 石家庄国域专利商标事务所有限公司 13112 | 代理人: | 张莉静 |
地址: | 071002 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 本发明提供了一种DNA中5‑羟甲基胞嘧啶的定量分析方法,本发明是基于AbasI酶特异性识别并切割含有5ghmC的双链DNA特性,结合连接‑聚合酶链式反应(PCR)反应建立5hmC的定量分析方法。AbasI酶能够识别双链DNA中的5ghmC,并能在距修饰的胞嘧啶3´侧11‑13碱基处进行切割,形成一个2‑3碱基的3´突出末端。酶切后的产物会与Harpin探针在SplintR连接酶的作用下进行连接,然后将连接产物作为模板进行PCR扩增,最后根据标准曲线图来定量实际样品中5hmC的含量。本发明样品处理步骤简单,对实验操作者及实验条件没有特殊要求。本发明的灵敏度高,选择性好,成本较低。 | ||
搜索关键词: | 一种 dna 甲基 胞嘧啶 定量分析 方法 | ||
【主权项】:
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