[发明专利]GII.17型诺如病毒全人源中和性单链抗体的制备及鉴定方法在审
| 申请号： | 202110244770.0 | 申请日： | 2021-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN113061181A | 公开（公告）日： | 2021-07-02 |
| 发明（设计）人： | 戴迎春;侯玉珍;王璐;张绪富 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C07K1/22;C12N15/13;C12N15/70;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 赵蕊红 |
| 地址： | 510515 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供的一种GII.17型诺如病毒全人源中和性单链抗体的制备及鉴定方法，包括：S1：利用GII.17NoV目标对象恢复期外周血和合成人抗体基因的引物制备得到scFv基因，构建重组质粒pCANTAB‑5E‑scFv电转化后培养获得初级全人源噬菌体单链抗体库。S2：采用甘氨酸‑盐酸洗脱法富集淘筛并以GII.17NoV P颗粒为固相抗原，制备得特异性GII.17NoV噬菌体单链抗体库，离心制备噬菌体上清，Phage‑ELISA鉴定噬菌体上清的特异性。S3：设计原核表达引物，以步骤S2的阳性噬菌体上清的菌液为模板，扩增scFv片段，构建pGEX‑scFv重组质粒，利用大肠杆菌表达系统表达pGEX‑scFv重组质粒，再用GST‑resin亲和层析柱纯化，加入凝血酶去除融合标签蛋白GST‑tag后获得scFv纯蛋白。该方法制备出的GII.17NoV全人源单链抗体有效库容大，且重组率和多样性好。 | ||
| 搜索关键词： | gii 17 型诺如 病毒 全人 中和 性单链 抗体 制备 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
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