[发明专利]VacA重组蛋白的制备、复性和保存方法在审
申请号: | 202110265719.8 | 申请日: | 2021-03-11 |
公开(公告)号: | CN113005133A | 公开(公告)日: | 2021-06-22 |
发明(设计)人: | 王芬;袁玲芝;肖士郎;蔡婷;陈冰 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅三医院 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12P21/02;C07K14/195;C07K1/14;C07K1/22;C07K1/34;C07K1/36;C07K1/113 |
代理公司: | 长沙轩荣专利代理有限公司 43235 | 代理人: | 李喆 |
地址: | 410000 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明属于生物医药领域,具体涉及VacA重组蛋白的制备、复性和保存方法。包括:获取VacA基因序列,经PCR扩增后构建VacA重组表达载体;将所述表达载体转化到大肠埃希菌中,经扩增培养后加入诱导剂诱导蛋白表达,获得菌液;将所述菌液离心后取细菌沉淀物,采用裂解缓冲液对所述细菌沉淀物超声裂解,获得细胞裂解物;将所述细胞裂解物纯化后获得VacA重组蛋白;将所述VacA重组蛋白采用pH=2.9的醋酸缓冲液进行透析复性并保存,上述制备、复性和保存方法能够获得高活性VacA重组蛋白,能够诱导细胞凋亡。 | ||
搜索关键词: | vaca 重组 蛋白 制备 复性 保存 方法 | ||
【主权项】:
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