[发明专利]一种PTCH1基因缺失间充质干细胞的建立方法在审
申请号: | 202110272094.8 | 申请日: | 2021-03-12 |
公开(公告)号: | CN112852819A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 魏昌盛;林强;王溢文;陈网平 | 申请(专利权)人: | 江苏和泽干细胞基因工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京成实知识产权代理有限公司 11724 | 代理人: | 张焱 |
地址: | 210000 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种PTCH1基因缺失间充质干细胞的建立方法,具体步骤包括:步骤1,根据PTCH1基因序列,设计sgRNA序列;步骤2,sgRNA活性检测,确定最优sgRNA,最优sgRNA序列为GAGCTGTGGGTGGAAGTTGG;步骤3,将步骤2中切割效率最高的sgRNA和嘌呤霉素抗性的PGK‑puro质粒电转到骨髓间充质干细胞;步骤4,基因敲除验证;步骤5,将基因敲除质粒进行测序,本发明构建的PTCH1基因缺失间充质干细胞,可用于筛选促成骨形成药物。 | ||
搜索关键词: | 一种 ptch1 基因 缺失 间充质 干细胞 建立 方法 | ||
【主权项】:
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