[发明专利]基于CRISPR-dCase9系统抑制细胞核内lncRNA表达的方法在审
| 申请号： | 202110298553.X | 申请日： | 2021-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN113151265A | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 赖骞 | 申请（专利权）人： | 赖骞 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N15/65;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 宫建华 |
| 地址： | 361000 福建省厦*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CRISPR‑dCase9系统抑制细胞核内lncRNA表达的方法，该方法包括：选取lncRNA转录起始位点上下游100bp序列范围用于设计向导sgRNA序列；获取用于系统使用的Oligo；切割慢病毒载体，利用连接酶将修改后sgRNA序列对应的Oligo连接到慢病毒载体上；针对标靶细胞系，利用慢病毒包装试剂盒包装慢病毒及dcase9载体，分别制备红色荧光慢病毒以及蓝色荧光慢病毒并转染标靶细胞系，分选双重阳性细胞；筛选获得稳定转染慢病毒及dcase9载体的单克隆标靶细胞系。本发明旨在解决现有的基因敲减技术无法稳定敲减核内lncRNA的技术问题。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 crispr dcase9 系统 抑制 细胞核 lncrna 表达 方法 | ||
【主权项】：
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