[发明专利]磷脂酶C突变体、制备方法及其应用有效
| 申请号： | 202110509125.7 | 申请日： | 2021-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN113215130B | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 刘静雯;代鹏;李桂玲;张永辉 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70 |
| 代理公司： | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人： | 王凤玲;尤怀成 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种磷脂酶C突变体、制备方法及其应用，该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。该突变体是将源自蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)HSL3野生型磷脂酶C的第96位苯丙氨酸F突变成精氨酸R；第153位谷氨酰胺Q突变成脯氨酸P。与野生型重组PLC相比，该突变体的热稳定性得到了显著改善，最佳反应温度从80℃提高到90℃，是目前报道的最高反应温度；在该温度下孵育50min仍可保留56％左右的酶活。该突变体的kcat和kcat/Km分别是野生型的5.64倍和2.37倍，且对底物的适应性也有所改善。同源建模分析表明，突变导致无规则卷曲比例下降并抑制了特定loop的活动，从而显著提高突变体的热稳定性和活性。 | ||
| 搜索关键词： | 磷脂酶 突变体 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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