[发明专利]口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测体系和方法的建立在审

专利信息
申请号: 202110550305.X 申请日: 2021-05-19
公开(公告)号: CN113564276A 公开(公告)日: 2021-10-29
发明(设计)人: 汪洋;张杰;侯谦;马维民;何继军;代军飞;李茜;李苗苗;爱斯纳非.科友斯.伍赛特;陈达年;丁耀忠;刘永生;张永光 申请(专利权)人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
代理公司: 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 代理人: 郭卫芹
地址: 730046 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 发明公开了FMDV可视化RT‑LAMP检测方法的建立。以合成的39条3D‑T7序列的体外RNA转录本为模板,对RT‑LAMP引物、引物浓度、反应时间、反应温度和显色剂等进行了筛选。建立了FMDV的RT‑LAMP检测方法,总体系为20μL,包括RT‑LAMP缓冲液15.2μL,BstAMV酶混合液1.5μL,外引物F3和B3各0.04μL(100μM),内引物FIP和BIP各0.5μL(100μM),环引物Floop和Bloop各0.11μL(100μM),中性红1μL(500μM),模板1μL。反应时间55min,反应温度65℃。反应结束后,若反应管溶液变为粉红色判为阳性,若为橘黄色则判为阴性。该方法特异性强,不与BVDV、ORFV、SPPV/GTPV、SVDV、BTV、PRRSV、CSFV、PRV、PPV和PCV等病毒发生反应。建立的FMDV可视化RT‑LAMP方法为基层现场检测奠定了基础,以达到快速诊断FMDV的目的。
搜索关键词: 口蹄疫病毒 可视化 rt lamp 检测 体系 方法 建立
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