[发明专利]口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测体系和方法的建立在审
申请号: | 202110550305.X | 申请日: | 2021-05-19 |
公开(公告)号: | CN113564276A | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
发明(设计)人: | 汪洋;张杰;侯谦;马维民;何继军;代军飞;李茜;李苗苗;爱斯纳非.科友斯.伍赛特;陈达年;丁耀忠;刘永生;张永光 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 | 代理人: | 郭卫芹 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开了FMDV可视化RT‑LAMP检测方法的建立。以合成的39条3D‑T7序列的体外RNA转录本为模板,对RT‑LAMP引物、引物浓度、反应时间、反应温度和显色剂等进行了筛选。建立了FMDV的RT‑LAMP检测方法,总体系为20μL,包括RT‑LAMP缓冲液15.2μL,BstAMV酶混合液1.5μL,外引物F3和B3各0.04μL(100μM),内引物FIP和BIP各0.5μL(100μM),环引物Floop和Bloop各0.11μL(100μM),中性红1μL(500μM),模板1μL。反应时间55min,反应温度65℃。反应结束后,若反应管溶液变为粉红色判为阳性,若为橘黄色则判为阴性。该方法特异性强,不与BVDV、ORFV、SPPV/GTPV、SVDV、BTV、PRRSV、CSFV、PRV、PPV和PCV等病毒发生反应。建立的FMDV可视化RT‑LAMP方法为基层现场检测奠定了基础,以达到快速诊断FMDV的目的。 | ||
搜索关键词: | 口蹄疫病毒 可视化 rt lamp 检测 体系 方法 建立 | ||
【主权项】:
暂无信息
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