[发明专利]一种快速筛选基因编辑猪阳性细胞系的方法有效
| 申请号： | 202110557343.8 | 申请日： | 2021-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN113249456B | 公开（公告）日： | 2023-05-23 |
| 发明（设计）人： | 魏红江;赵红业;赵恒;角德灵;范柠粼 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/06 |
| 代理公司： | 北京隆达恒晟知识产权代理有限公司 11899 | 代理人： | 李中强 |
| 地址： | 650201 云南省昆*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速筛选基因编辑猪阳性细胞系的方法，属动物转基因技术领域。本发明针对已知的不同基因编辑类型的猪阳性成纤维细胞系，进行PCR、酶切及测序鉴定，基于细胞PCR条带灰度值，筛选获得细胞基因型鉴定所需的最低细胞量；将目的基因表达载体转染至猪成纤维细胞并进行单细胞培养筛选，当单克隆细胞系形成时，抠取后于培养板扩大培养并按上述最低细胞量计数进行基因型鉴定，经鉴定后立即进行体细胞核移植，取出胎儿分离培养及鉴定后获得大量转基因猪阳性成纤维细胞系。本发明克服了基因编辑猪阳性细胞系筛选周期长、效率低、成功率低的问题，对促进转基因猪的生产具有重要的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 筛选 基因 编辑 阳性 细胞系 方法 | ||
【主权项】：
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