[发明专利]一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法在审
| 申请号： | 202110583863.6 | 申请日： | 2021-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN113122571A | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 金双侠;张献龙;周家伟;扶春阳 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 张国栋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及植物基因工程技术领域，且公开了一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法，所述CRISPR/Cas9载体p7N‑EC通过下列步骤制备获得：获得目的序列EC1.2en‑1.1p，具体地，该目的序列通过以下步骤制备获得：先获得含有目的序列EC1.2en‑1.1p的载体pHEE401E‑ccdB，以pHEE401E‑ccdB载体为模板，利用Primer5软件设计引物，通过PCR扩增获得EC1.2en‑1.1p目的序列，利用SbfⅠ、BstBⅠ两种酶对pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ载体进行双酶切去除Ubiquitin启动子得到线性载体，然后与获得的EC1.2en‑1.1p目的序列进行In‑fusion连接。该新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法，能对棉花基因组进行有效的基因编辑，且具有一定的基因编辑效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 crispr cas9 基因 编辑 载体 制备 方法 | ||
【主权项】：
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