[发明专利]一种热稳定性提高的蛋白酶K突变体有效
申请号: | 202110615088.8 | 申请日: | 2021-06-02 |
公开(公告)号: | CN113215138B | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 杨广宇;王梁;徐灿;宫安;施婧妮 | 申请(专利权)人: | 武汉瀚海新酶生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/60 | 分类号: | C12N9/60;C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;C12Q1/6806;C12R1/84 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 430223 湖北省武汉市东湖新技术开发区*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种热稳定性提高的蛋白酶K突变体,属于基因工程和酶工程领域。本发明从林伯氏白色念球菌(Tritirachium album)蛋白酶K分子结构入手,得热稳定性提高的突变体,将编码蛋白酶K野生型及其突变体基因与pPICZαA质粒连接构建重组表达载体,并将该重组表达载体转化至巴斯德毕赤酵母中构建重组工程菌进行异源分泌表达,采用高效的阳离子交换层析纯化蛋白即得野生型蛋白酶K(PRK‑WT)和突变型蛋白酶K(PRK‑T94Y、PRK‑7Y),突变型蛋白酶在25℃、pH 6.0条件下保存12个月能够保留95%以上的活力。 | ||
搜索关键词: | 一种 热稳定性 提高 蛋白酶 突变体 | ||
【主权项】:
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