[发明专利]一种基于线性质粒载体从基因组文库中靶向克隆目标片段的方法有效
| 申请号： | 202110620674.1 | 申请日： | 2021-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN113355338B | 公开（公告）日： | 2023-04-28 |
| 发明（设计）人： | 元英进;崔有志;李炳志;周见庭 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 潘颖 |
| 地址： | 300073 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及靶向克隆技术领域，特别涉及一种基于线性质粒载体从基因组文库中靶向克隆目标片段的方法。包括：带有tos的环形质粒通过PCR扩增方式，在体外扩增并使用TelN原端粒酶酶切获得线性化的克隆载体同时，在载体两端引入与目标基因组片段侧翼相同的序列，得到高浓度线性化载体；将线性化载体与基因组文库进行体外组装，得到组装产物；在宿主基因中整合入TelN蛋白表达基因，得到整合有TelN蛋白的宿主；将组装产物转入整合有TelN蛋白的宿主中，筛选目标片段。本发明技术具有高效、靶向性强、低成本、大容量、易操作等特点。基于该发明能实现对基因组大片段的高效率一步克隆，实现最大156kb长度基因组序列的克隆。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 线性 质粒 载体 基因组 文库 靶向 克隆 目标 片段 方法 | ||
【主权项】：
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