[发明专利]一种G418在少孢节丛孢菌中遗传转化筛选体系的建立方法在审
申请号: | 202110642739.2 | 申请日: | 2021-06-09 |
公开(公告)号: | CN113355347A | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
发明(设计)人: | 王永中;彭慧;盛康亮;汪静敏;孔小卫 | 申请(专利权)人: | 安徽大学 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80;C12N15/65;C12N1/15;C12R1/645 |
代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人: | 徐冬 |
地址: | 230601 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了在少孢节丛孢菌中建立了一种新的遗传转化筛选体系,将有利于该真菌遗传转化体系的多层次应用。该方法包括如下步骤:首先将G418编码的对应氨基酸序列根据少孢节丛孢菌密码子偏好性进行密码子优化;将优化后的DNA序列在5’加上Ptef,3’加上Ttef,接着连接在pUC57载体上进行合成,获得Ptef‑G418‑Ttef的DNA模板;在使用时根据实验要求设计特异性引物进行PCR合成使用;使用同源重组‑原生质体转化法将G418导入少孢节丛孢菌。本发明为少孢节丛孢菌增加了一种新的抗性选择标记,可使原来对G418敏感的少孢节丛孢菌对其产生抗性,可对少孢节丛孢菌进行遗传基因操作,为研究少孢节丛孢菌的基因功能带来了巨大方便,而且费用低廉。 | ||
搜索关键词: | 一种 g418 少孢节丛孢菌中 遗传 转化 筛选 体系 建立 方法 | ||
【主权项】:
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