[发明专利]TET酶活性测定方法及TET酶活性小分子激活剂或抑制剂的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 202110969301.5 | 申请日： | 2021-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN113640283A | 公开（公告）日： | 2021-11-12 |
| 发明（设计）人： | 江翱;刘倩;马海玲;孙睿;陈晶晶;侯策;曹振;宋东亮 | 申请（专利权）人： | 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78;G01N21/31 |
| 代理公司： | 苏州根号专利代理事务所(普通合伙) 32276 | 代理人： | 朱华庆 |
| 地址： | 200120 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种TET酶活性测定方法，其特征在于其步骤包括：将5mC DNA与待测TET酶混合后孵育；在反应体系中加入SDH和DCPIP进行反应；加入三氯乙酸终止反应；酶标仪测量反应液在600nm处的吸收峰值，峰值越高则代表酶活性越强。还公开了SDH和DCPIP联合在测定TET酶活性中的应用，以及TET酶活性小分子激活剂或抑制剂的高通量筛选方法。本发明提供了一种简便快速的TET酶活性测定方法，利用TET酶氧化反应产物琥珀酸盐在琥珀酸脱氢酶的催化下释放出还原氢，还原氢被DCPIP捕获生成DCPIPH2（蓝色），在波长600 nm处出现特异性的吸收峰。整个方法流程只需要4步操作、一管式反应、耗时1 h即可完成，具有成本低、通量大、适用范围广和准确性高的优点。 | ||
| 搜索关键词： | tet 活性 测定 方法 分子 激活剂 抑制剂 通量 筛选 | ||
【主权项】：
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