[发明专利]全能核酸酶的蛋白制备方法在审

专利信息
申请号: 202110977124.5 申请日: 2021-08-24
公开(公告)号: CN113462673A 公开(公告)日: 2021-10-01
发明(设计)人: 刘絮;吴笛;刘梓晗;赵亮 申请(专利权)人: 晟林源(河南)生物科技有限公司
主分类号: C12N9/22 分类号: C12N9/22;C12N15/55;C12N15/70
代理公司: 郑州隆盛专利代理事务所(普通合伙) 41143 代理人: 鲍立阳
地址: 451162 河南省郑州市航空港经济综合实验区黄海*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明公开了一种全能核酸酶的制备方法,涉及生物制备领域,S1:首先使用信号肽制备SEQ ID No.1所示多肽氨基酸序列,然后将带有SEQ ID No.1所示多肽氨基酸序列的表达盒导入宿主细胞;S2:培养S1中导入后的宿主细胞,并加入IPTG诱导表达SEQ ID No.1所示蛋白;其中培养条件为:培养至OD600nm为0.6‑1.0,加入1mM IPTG,28℃诱导表达;S3:在S2步骤培养完成后,通过渗透休克法提取周质空间表达的SEQ ID No.1所示蛋白;其中渗透休克法具体操作步骤为:收集培养物于12000g离心1min,收集菌体,高渗溶液混匀10min,离心去上清,5mM MgCl2溶液混匀10min,离心取上清即为蛋白上清溶液。本发明采用周质空间分泌表达方法制备SEQ ID No.1所示多肽不经细胞裂解,避免包涵体处理,纯化工艺简单,降低生产成本。
搜索关键词: 全能 核酸酶 蛋白 制备 方法
【主权项】:
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