[发明专利]pBD1基因荧光报告肠上皮细胞系的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 202111002489.2 | 申请日： | 2021-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN113621648A | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | 汪以真;程远之;杜满;肖肖;靳明亮;宗鑫;王凤芹;路则庆 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/53;C12N15/12;C12Q1/66;C12R1/91 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林松海 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种pBD1基因荧光报告肠上皮细胞系的构建方法及其应用。仔猪小肠样品分离得到基因组DNA，并利用PCR技术扩增pBD1启动子片段，序列如SEQ ID NO.1所示，将pBD1启动子片段克隆到pGL4.21荧光报告载体中得到pBD1荧光报告质粒，进行酶切线性化后转染猪肠上皮细胞，从而筛选获得阳性细胞系。本发明提供的筛选细胞系的应用，一次可最多检测数十种营养物质对pBD1基因的调控作用，本发明所公开的方法创新性地利用酶切线性化质粒载体转染细胞，构建了一种可长期稳定表达pBD1基因的筛选细胞系，极大地提高了营养物质的筛选效率，可克服现有方法中细胞因生长状态、不同检测方法等因素造成的干扰，有利于开发具有pBD1基因调控功能的营养物质及其后续应用生产。 | ||
| 搜索关键词： | pbd1 基因 荧光 报告 上皮 细胞系 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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