[发明专利]一种利用印度洋交替单胞菌制备普鲁兰酶的方法在审

专利信息
申请号: 202111021091.3 申请日: 2021-09-01
公开(公告)号: CN114164195A 公开(公告)日: 2022-03-11
发明(设计)人: 陈颢;何培青;王宗灵 申请(专利权)人: 自然资源部第一海洋研究所;中国大洋矿产资源研究开发协会;中国大洋事务管理局
主分类号: C12N9/44 分类号: C12N9/44;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 山东重诺律师事务所 37228 代理人: 刘衍军
地址: 266061 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明属于食品加工技术领域,提供了一种利用印度洋交替单胞菌制备普鲁兰酶的方法。步骤如下:提取菌株Alteromonas sp.162基因组;扩增获得普鲁兰酶基因并构建重组质粒,以重组质粒为模板,扩增获得普鲁兰酶点变体基因h611Q并构建点突变重组质粒,以点突变体重组质粒为模板,扩增普鲁兰酶叠加突变体基因puld5/h611Q,构建叠加突变体重组质粒;将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞,制备并纯化叠加突变体Puld5/H611Q。其优点:Puld5/H611Q比活力最高达145.2U·mg‑1,比鲁兰酶提高2.5倍;Puld5/H611Q最适pH为6.0,最适反应温度为50℃,比普鲁兰酶提高15℃,半衰期为普鲁兰酶的5倍;Puld5/H611Q催化效率约为普鲁兰酶的1.2倍。将截断突变和点突变相结合,制备方法简单,获得的Puld5/H611Q性能优于现有普鲁兰酶,可提高淀粉利用率。
搜索关键词: 一种 利用 印度洋 交替 单胞菌 制备 普鲁兰酶 方法
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