[发明专利]一种CRISPR-Cas9基因编辑工具及其编辑方法在审
申请号: | 202111031355.3 | 申请日: | 2021-09-03 |
公开(公告)号: | CN113584036A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 杨国华;胡俊;陈志毅;李婷;张德庆;袁天立;林宝仪 | 申请(专利权)人: | 武汉翼康基因科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/55;C12N9/22;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
代理公司: | 湖北天领艾匹律师事务所 42252 | 代理人: | 胡振宇 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种CRISPR‑Cas9基因编辑工具及其编辑方法,包括pML‑Cas9质粒以及pJM‑sgRNA质粒;pML‑Cas9质粒包括一个pMV261表达载体、一个TaU3p启动子、一个靶基因序列、一个sgRNA4TmC+5结构、一个Cas9基因和一个NHEJ修复基因,pMV261表达载体、TaU3p启动子、靶基因序列、sgRNA4TmC+5结构、Cas9基因和NHEJ修复基因按照上述顺序依次连接,pMV261表达载体上的Hsp60启动子被替换为了TaU3p启动子;NHEJ修复基因包含编码DNA末端结合蛋白mku的基因以及编码DNA连接酶LigD的基因;Cas9基因位于pMV261表达载体的TaU3p启动子的下游以及pMV261表达载体的rrnB终止子上游,本发明涉及基因工程技术领域。该CRISPR‑Cas9基因编辑工具及其编辑方法,可实现小麦等作物CRISPR‑Cas9载体转化后突变率低、获得CRISPR‑Cas9转基因突变株系难的问题,节约了转化时间,减少了转化成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 crispr cas9 基因 编辑 工具 及其 方法 | ||
【主权项】:
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