[发明专利]一种在猪上诱导高效表达外源基因的方法在审
申请号: | 202111116983.1 | 申请日: | 2021-09-23 |
公开(公告)号: | CN113817773A | 公开(公告)日: | 2021-12-21 |
发明(设计)人: | 赖良学;王可品;金琴 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院;生物岛实验室;三亚猪种质资源创新研究院 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/65 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 边人洲 |
地址: | 510530 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种在猪上诱导高效表达外源基因的方法。所述方法包括在猪基因组内的开放性位点Rosa26和安全性位点Hipp11进行基因修饰,所述基因修饰包括将rtTA表达盒敲入Rosa26位点,将TRE3G启动的报告基因表达盒敲入Hipp11位点。本发明通过在猪细胞水平实现双位点定点敲入Tet‑on系统同时引入phiC31/att系统,进一步通过SCNT获得Dox诱导外源基因表达猪模型,利用该猪模型,在细胞、胚胎和体内水平实验验证结果表明此双位点定点敲入Tet‑on系统能高效稳定的实现Dox调控外源基因的表达与关闭,未检测到不受调控的表达泄漏。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 高效 表达 基因 方法 | ||
【主权项】:
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