[发明专利]一种基于RT-RPA-LFD技术快速检测苹果茎沟病毒的方法在审
申请号: | 202111249403.6 | 申请日: | 2021-10-26 |
公开(公告)号: | CN113999936A | 公开(公告)日: | 2022-02-01 |
发明(设计)人: | 张东;马小燕;王敏瑞;鲍俊华;李金伟;程曦;马娟娟 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12N15/11;C12Q1/6844 |
代理公司: | 西安长和专利代理有限公司 61227 | 代理人: | 黄伟洪 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明属于病毒检测技术领域,公开了一种基于RT‑RPA‑LFD技术快速检测苹果茎沟病毒的方法,包括:材料采集、RNA提取与cDNA的反转录合成;引物设计;重组酶聚合酶扩增和侧流层析试纸条检测。本发明将反转录和重组酶聚合酶扩增结合,建立并优化了RT‑RPA反应条件,综合琼脂糖凝胶电泳和侧流层析试纸条的分析结果,选择最适反应条件,RPA反应扩增目的条带大小为267bp,琼脂糖凝胶电泳结果显示RPA反应获得了预期目的产物。本发明利用一种简单、廉价且快速的RNA提取方法,直接从苹果叶片上粗提取RNA检测苹果ASGV,结果显示所检样品的RT‑PCR和一步法RT‑RPA的检测结果一致。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 rt rpa lfd 技术 快速 检测 苹果 病毒 方法 | ||
【主权项】:
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