[发明专利]一种CHO-S.attp重组细胞株及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 202111306618.7 | 申请日： | 2021-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN114107380A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 张婉;陶琴;秦毅;王卓智;顾继杰 | 申请（专利权）人： | 上海药明生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;C12N15/67;C12N15/65;C12N5/10;C12Q1/6888;C12R1/91 |
| 代理公司： | 上海市汇业律师事务所 31325 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 200131 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开一种CHO‑S.attp重组细胞株的构建方法和应用，构建方法主要包括以下步骤：将attp位点序列和GFP报告基因构建到含有PCDNA3.3载体，将带有attB位点序列和目的蛋白基因构建到pcDNA5载体，Bxb1重组酶基因构建到POG44载体；将所得的含有attp质粒转染CHO‑S细胞，抗生素筛选，FACS检测，获得CHO‑S.attp细胞池；利用所得细胞池，进行有限稀释，加压筛选单克隆，通过FACS检测，获得CHO‑S.attp细胞株；将attb和目的基因质粒与Bxb1重组酶共转染CHO‑S.attp细胞株，加压筛选，FACS检测，获得阳性率高，表达量高，稳定性好的细胞系。本发明具有耗时短，表达量高，阳性率高，稳定性好等优点，可直接用于抗体筛选，并可以提高抗体筛选的质量，加速后续的抗体体外研发进程。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 cho attp 重组 细胞株 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
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