[发明专利]一种检测高盐高蛋白质生物样品中多聚核苷酸激酶的方法

摘要

本发明公开了一种寡核苷酸序列稳定的银纳米团簇（ssDNA/AgNCs）用于高盐、高蛋白质等复杂生物基质样品中T4多聚合核苷酸激酶（T4 PNK）活性检测的新方法。复杂生物基质样品中存在大量盐分和蛋白质，需要经过高倍数稀释，否则难以实现荧光检测T4 PNK。研究发现，当T4 PNK等酶促反应完成时，首先加入定量AgNO3溶液，其次加NaIO4和Zn(NO3)2溶液氧化蛋白质，最后向溶液中加入暗态ssDNA/AgNCs，孵育后可得到亮态ssDNA/AgNCs，进行荧光检测T4 PNK的活性。该方法检测灵敏度高，抗干扰能力强，无需稀释即可适用高盐、高蛋白质的复杂生物基质样品。