[发明专利]CL7蛋白质、高活性重组TET酶CL7-NgTET1、其原核表达载体及应用在审
| 申请号： | 202111476804.5 | 申请日： | 2021-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN114107252A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 宋东亮;韦磊;邬升杨;李婕;刘倩;曹振;江翱;黄开瑜 | 申请（专利权）人： | 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N9/02;C12N15/70;C12Q1/25 |
| 代理公司： | 苏州根号专利代理事务所(普通合伙) 32276 | 代理人： | 朱华庆 |
| 地址： | 200120 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种屏蔽核酸酶活性的CL7蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。还公开了一种高活性重组TET酶CL7‑NgTET1，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，及其原核表达载体，其结构为：pET28A‑N6H‑MBP‑CL7‑NgTET1，还公开了其在酶转化法检测DNA甲基化中的应用。本发明在NgTET1基础上进行了设计和改造，通过融合CL7 domain获得了CL7‑NgTET1重组融合蛋白。该重组融合蛋白能够显著提高TET蛋白对5mC的氧化能力，提高了该酶的体外生物活力。通过在载体N端引入MBP融合蛋白，可在原核系统中表达，从而极大提高可溶蛋白的产量，从而同时解决了TET酶产量低和酶活低的问题，也极大缩短了生产周期及降低成本。 | ||
| 搜索关键词： | cl7 蛋白质 活性 重组 tet ngtet1 表达 载体 应用 | ||
【主权项】：
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