[发明专利]一种自主构建sT2细胞表达外源性SLA-2基因及其制备方法在审
| 申请号： | 202111509941.4 | 申请日： | 2021-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN114181973A | 公开（公告）日： | 2022-03-15 |
| 发明（设计）人： | 高凤山 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/65;C12N15/12;C12N15/62;C12N5/10 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 胡景波 |
| 地址： | 116622 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种自主构建sT2细胞表达外源性SLA‑2基因及其制备方法。我们构建了SLA‑2‑HB01、SLA‑2‑HB01‑Flag和SLA‑2‑HB01‑3×Flag真核表达载体，并经过无内毒素质粒的提取获得纯度较高的目的基因质粒，通过与psPAX2和pMD2.G混合瞬时转染293T细胞获得高滴度的慢病毒颗粒。分别收获SLA‑2‑HB01、SLA‑2‑HB01‑Flag和SLA‑2‑HB01‑3×Flag病毒，分别感染sT2细胞，经过筛选和Western blotting检测，证实成功构建SLA‑2‑HB01/sT2、SLA‑2‑HB01‑Flag/sT2和SLA‑2‑HB01‑3×Flag/sT2细胞系，并均优势表达SLA‑2‑HB01。另外，Western blotting实验也证实PK15细胞、sT2细胞和已转染sT2细胞中β2m蛋白表达量基本一致，说保守的轻链β2m在细胞内表达量稳定；上述数据为后续表位筛选奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 自主 构建 st2 细胞 表达 外源性 sla 基因 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
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