[发明专利]缺失丙二酸半醛旁路代谢路径脱氮假单胞菌的构建方法在审
申请号: | 202111513324.1 | 申请日: | 2021-12-12 |
公开(公告)号: | CN114317388A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 周生芳;李红雨;章颖莉 | 申请(专利权)人: | 江苏师范大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/78;C12N15/53;C12N15/54;C12P7/42;C12R1/38 |
代理公司: | 徐州先卓知识产权代理事务所(普通合伙) 32555 | 代理人: | 陈俊杰 |
地址: | 221116 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 缺失丙二酸半醛旁路代谢路径脱氮假单胞菌的构建方法,包括:(1)从已构建的脱氮假单胞菌ZAP01出发,在该菌株基因组DNA中分别单独和组合敲除mmsAI,mmsAII、mmsAIII和BAPAT基因,获得若干突变菌株;(2)通过构建质粒pUCPK‑AM,过表达3‑HP合成路径相关酶转化乙酸生产3‑HP;(3)在含有30mg/L的卡那霉素LB平板上筛选获得目标突变重组菌。本发明的方法通过在脱氮假单胞菌中敲除丙二酸半醛脱氢酶和β‑丙氨酸‑丙酮酸转氨酶,完全阻断丙二酸半醛支路代谢路径,使更多的丙二酸半醛用于3‑HP的合成,从而提高乙酸合成3‑HP的产量。 | ||
搜索关键词: | 缺失 丙二酸半醛 旁路 代谢 路径 脱氮假单胞菌 构建 方法 | ||
【主权项】:
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