[发明专利]缺失丙二酸半醛旁路代谢路径脱氮假单胞菌的构建方法在审

专利信息
申请号: 202111513324.1 申请日: 2021-12-12
公开(公告)号: CN114317388A 公开(公告)日: 2022-04-12
发明(设计)人: 周生芳;李红雨;章颖莉 申请(专利权)人: 江苏师范大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/78;C12N15/53;C12N15/54;C12P7/42;C12R1/38
代理公司: 徐州先卓知识产权代理事务所(普通合伙) 32555 代理人: 陈俊杰
地址: 221116 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 缺失丙二酸半醛旁路代谢路径脱氮假单胞菌的构建方法,包括:(1)从已构建的脱氮假单胞菌ZAP01出发,在该菌株基因组DNA中分别单独和组合敲除mmsAI,mmsAII、mmsAIII和BAPAT基因,获得若干突变菌株;(2)通过构建质粒pUCPK‑AM,过表达3‑HP合成路径相关酶转化乙酸生产3‑HP;(3)在含有30mg/L的卡那霉素LB平板上筛选获得目标突变重组菌。本发明的方法通过在脱氮假单胞菌中敲除丙二酸半醛脱氢酶和β‑丙氨酸‑丙酮酸转氨酶,完全阻断丙二酸半醛支路代谢路径,使更多的丙二酸半醛用于3‑HP的合成,从而提高乙酸合成3‑HP的产量。
搜索关键词: 缺失 丙二酸半醛 旁路 代谢 路径 脱氮假单胞菌 构建 方法
【主权项】:
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