[发明专利]一种含有双sgRNA的特异性基因敲除的CRISPR/Cas9编辑质粒及其应用在审
申请号: | 202210037651.2 | 申请日: | 2022-01-13 |
公开(公告)号: | CN114317580A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 钱秀萍;胡梦怡;戈梅;魏维;饶敏;张芸;王孟圆 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学;上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N15/66;C12N15/113;C12N1/21;C12R1/01 |
代理公司: | 上海华工专利事务所(普通合伙) 31104 | 代理人: | 赵孟琴;缪利明 |
地址: | 200030 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种含有双sgRNA的特异性基因敲除的CRISPR/Cas9编辑质粒,包括双sgRNA和上下游同源臂,所述双sgRNA的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;所述的上下游同源臂是以A.keratiniphila HCCB10007基因组为模板,分别用SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示的引物进行PCR扩增获得。本发明还公开了所述的CRISPR/Cas9编辑质粒在水解角蛋白拟无枝酸菌中进行大片段基因敲除的应用。本发明实现了在水解角蛋白拟无枝酸菌中进行80kb以上大片段基因的精准敲除。 | ||
搜索关键词: | 一种 含有 sgrna 特异性 基因 crispr cas9 编辑 质粒 及其 应用 | ||
【主权项】:
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