[发明专利]结合生物基质胶生成hiPSC-RPE细胞膜片的方法在审

专利信息
申请号: 202210084503.6 申请日: 2022-01-25
公开(公告)号: CN114540302A 公开(公告)日: 2022-05-27
发明(设计)人: 李桂兰;刘奕志;郑颖丰 申请(专利权)人: 中山大学中山眼科中心
主分类号: C12N5/079 分类号: C12N5/079;C12N5/074
代理公司: 北京翔石知识产权代理事务所(普通合伙) 11816 代理人: 李勇
地址: 510060 *** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及一种结合生物基质胶生成hiPSC‑RPE细胞膜片的方法,包括,步骤S1,将预处理后的猪眼葡萄膜制备脱细胞基质胶;步骤S2,维持培养hiPSCs;步骤S3,培养hiPSC‑RPE悬浮球;步骤S4,hiPSC‑RPE细胞扩增培养;步骤S5,生成hiPSC‑RPE细胞膜片;其中,所述步骤S5中,将浓度为1%的Uvea‑Gel包被培养皿,于37℃放置30min左右,待Uvea‑Gel凝固,形成一层薄薄的膜样区域为BM膜,用以模拟天然BM微环境。本发明优化出从猪脉络膜组织分离制备脱细胞基质水凝胶,结合建立的hiPSC诱导3D视网膜分化系统,获得hiPSC‑RPE细胞,建立模拟Bruch膜(BM)微环境的生成RPE片的方法,为培养GMP级别干细胞提供安全有效的生物材料。
搜索关键词: 结合 生物 基质 生成 hipsc rpe 细胞 膜片 方法
【主权项】:
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