[发明专利]重组人轮状病毒VP7蛋白的表达、免疫原性的分析方法在审
| 申请号： | 202210115142.7 | 申请日： | 2022-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN114478714A | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 王红涛 | 申请（专利权）人： | 通化师范学院 |
| 主分类号： | C07K14/14 | 分类号： | C07K14/14;C12N15/46;C12N15/81;C12N1/19;C07K16/10;G01N33/543;G01N33/569;G01N33/577;A61K39/42;A61P31/14;A61P1/12;C12R1/645 |
| 代理公司： | 通化旺维专利商标事务所有限公司 22205 | 代理人： | 王伟 |
| 地址： | 134000 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明属于生物工程技术领域，即重组人轮状病毒VP7蛋白的表达、免疫原性的分析方法。首先，根据GeneBank中已发表的VP7全序列（NC_007571.1）设计引物，通过对病料核酸提取，反转录cDNA为模板，克隆VP7基因后并构建表达载体pESP‑2‑VP7，转化粟酒裂殖酵母。经过1%IPTG诱导VP7表达，分离纯化，获得VP7蛋白，将VP7蛋白以不同免疫方式免疫小鼠评价其免疫保护效果。结果表明：引物设计与预测结果一致，克隆VP7基因长度为1050bp，SDS‑PAGE以及Western Blot鉴定结果表明其蛋白大小为63 kDa；VP7蛋白免疫小鼠后，其IgG、SIgA和中和抗体结果显示，50μg/只滴鼻免疫效果优于20μg/只滴鼻和注射组（50、20μg/只）；且滴鼻免疫具有较高的攻毒保护率为100%。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 轮状病毒 vp7 蛋白 表达 免疫原性 分析 方法 | ||
【主权项】：
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