[发明专利]一种基于启动子构建文库的方法及其文库在审
申请号: | 202210161966.8 | 申请日: | 2022-02-22 |
公开(公告)号: | CN114411266A | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 王娟;唐冲 | 申请(专利权)人: | 深圳华大基因股份有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6806;C12Q1/6869 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 周建军;彭家恩 |
地址: | 518083 广东省深圳市盐田*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 一种基于启动子构建文库的方法及其文库。该方法包括:打断步骤,包括对待测样本进行打断处理,获得打断后的待测样本;酶促甲基化转化步骤,包括对打断后的待测样本进行酶促甲基化转化;T7启动子连接步骤,包括将酶促甲基化转化处理后的待测样本与T7启动子退火,反应得到连接有T7启动子的待测样本;体外转录步骤,包括将连接有T7启动子的待测样本转录为RNA;反转录及扩增步骤,包括对RNA进行反转录、PCR扩增,获得文库。相比于现有技术中直接做PCR,本发明中T7的转录(针对富含尿嘧啶的DNA)更加均一,转录能获得较多的RNA作为下一步cDNA扩增的模板,极大地提升了甲基化的覆盖度。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 启动子 构建 文库 方法 及其 | ||
【主权项】:
暂无信息
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