[发明专利]一种用于检测单个CAR-T细胞的慢病毒载体拷贝数的方法及其应用在审
| 申请号： | 202210406094.7 | 申请日： | 2022-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN114686576A | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 张同存;张琴星 | 申请（专利权）人： | 武汉科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 武汉红观专利代理事务所(普通合伙) 42247 | 代理人： | 赵志汝 |
| 地址： | 430000 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种用于检测单个CAR‑T细胞的慢病毒载体拷贝数的方法，包括如下步骤：S1，以β‑globin为内参基因，设计β‑globin的qPCR引物和探针，利用β‑globin的质粒模板建立标准曲线1；S2，设计目的基因的引物和探针，利用目的基因的质粒模板建立标准曲线2；S3，分别使用β‑globin和目的基因的qPCR引物对待测样本进行PCR扩增，从标准曲线1上计算出待测样本的β‑globin拷贝数，从标准曲线2上计算出待测样品的CAR拷贝数，然后根据公式计算出目的基因相对细胞数的拷贝数。本发明以β‑globin为内源参照基因，能够稳定且有效地检测出整合入CAR‑T细胞基因组中整合的病毒载体拷贝数，且能够换算成平均每个CAR‑T细胞基因组中整合的病毒载体拷贝数。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 单个 car 细胞 病毒 载体 拷贝 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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