[发明专利]一种在Raw264.7细胞中快速构建稳定高表达细胞株的方法在审
| 申请号： | 202210459610.2 | 申请日： | 2022-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN114686502A | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 张云芳;高学娟 | 申请（专利权）人： | 广州市花都区人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/64 | 分类号： | C12N15/64;C12N15/867;C12N7/00;C12N5/10;C12N15/12 |
| 代理公司： | 广州中浚雄杰知识产权代理有限责任公司 44254 | 代理人： | 李肇伟 |
| 地址： | 510800 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 一种在Raw264.7细胞中快速构建稳定高表达细胞株的方法：将质粒转化到感受态DH5α；对转化后的DH5α扩大培养，提取质粒；将转后的大肠杆菌进行质粒提取，获得将目的基因与载体连接，转化到感受态DH5α；对转化后的DH5α扩大培养，提取质粒；将获得的质粒转染293T细胞，获得慢病毒液；利用PTG8000浓缩病毒液的方法浓缩病毒液；利用电转仪通过电转的方式将浓缩病毒转入Raw264.7细胞；稳定表达细胞的筛选；细胞扩增；获得稳定高表达目的基因的Raw264.7细胞株。本发明利用电转仪解决了Raw264.7细胞难感染，难以构建稳定高表达细胞株的问题，操作简便，可以在短时间内获得稳定高表达某基因的Raw264.7细胞株。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 raw264 细胞 快速 构建 稳定 表达 细胞株 方法 | ||
【主权项】：
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