[发明专利]一种大肠杆菌热敏肠毒素活性、稳定性检测以及多克隆抗体的制备在审
| 申请号： | 202210499407.8 | 申请日： | 2022-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN115505623A | 公开（公告）日： | 2022-12-23 |
| 发明（设计）人： | 张倩;马维超;施晓洁;鲁冠杰 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;C07K16/12;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N5/00 |
| 代理公司： | 深圳博敖专利代理事务所(普通合伙) 44884 | 代理人： | 胡智援 |
| 地址： | 100096 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种大肠杆菌热敏肠毒素活性、稳定性检测以及多克隆抗体的制备，包括以下步骤：毒素体外活性验证：采用Bradford试剂盒检测纯化后LT蛋白浓度，并用完全培养基将其稀释到100μg·mL‑1，10μg·mL‑1，1μg·mL‑1，0.1μg·mL‑1，0.01μg·mL‑1。复苏Vero细胞进行传代培养，将消化下来的细胞计数并接种于24孔板中，37℃、5％CO2培养。细胞贴壁后设置LT蛋白处理组和空白对照组每组三个重复；培养3h后拍照观察细胞形态变化。本发明提取的LT蛋白活性良好，冻干后4℃保存稳定性最优；多次免疫后制备出多克隆抗体这不仅体现了LT具有良好的免疫原性，还可以为后续检测提供帮助。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大肠杆菌 热敏 毒素 活性 稳定性 检测 以及 克隆 抗体 制备 | ||
【主权项】：
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