[发明专利]一种单抗克隆与表达载体的构建及应用在审

专利信息
申请号: 202210568313.1 申请日: 2022-05-19
公开(公告)号: CN114736927A 公开(公告)日: 2022-07-12
发明(设计)人: 孙金福;冯泽众 申请(专利权)人: 东北大学
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/113;C07K16/10;C12N15/10
代理公司: 沈阳东大知识产权代理有限公司 21109 代理人: 宁佳
地址: 110819 辽宁*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明为一种单抗克隆与表达载体的构建及应用,属于分子克隆技术领域。构建时将抗体leader序列插入pCDNA3.1‑myc‑His载体HindIII和EcoRI酶切位点,将抗体CH、Ck和Cλ序列分别插入重组载体XhoI和Agel酶切位点,获得单抗克隆与表达载体。应用时,以单抗克隆与表达载体为模板PCR扩增获得载体线性DNA,与抗体可变区基因混合作为模板,PCR扩增获得抗体线性表达盒;筛选高活性抗体后,将载体线性DNA与抗体可变区基因无缝连接构建抗体质粒表达载体,表达抗体。本发明与现有技术相比省去1个载体构建、2个PCR反应、2个双酶切、3个DNA纯化,提高了抗体基因克隆与表达的效率。
搜索关键词: 一种 克隆 表达 载体 构建 应用
【主权项】:
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